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第十九期 TSK-GEL Alpha系列色譜柱

2015年02月11日source:管理員
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TSK-GEL Alpha 系列色譜柱既可用于凝膠過濾色譜也可用于凝膠滲透色譜,能夠用來分析水溶性和脂溶性多聚物。


特點:

獨特的親水性,聚乙烯樹脂為基材

機械穩定性強, 溶脹小

廣泛的溶劑使用范圍:100%水-100%非極性溶劑

TSK-GEL SuperAW 系列色譜柱和 Alpha 系列色譜柱具有相似的化學結構,粒徑和柱尺寸更小,

縮短分析時間,減少溶劑消耗,是高通量分析的首選。

以二甲基甲酰胺為流動相,可以精確確定樣品的分子量。 其保留行為與聚苯乙烯相似。



色譜柱的清洗

要定期清洗色譜柱,清洗的頻次取決于樣品的純度。使用過程中,偶爾有一些樣品是會吸附于柱內填充物上的,如果您正在使用的色譜柱,其某個性能指標(如:不對稱因子、保留時間、理論塔板數或者分離度)發生 10%或更大的變化時,請一定要注意清洗您的色譜柱。

各種 TSK-GEL 色譜柱都附帶了驗收報告單和操作條件與規格說明書。驗收報告單上給出了用于色譜柱性能驗收的測試方法;操作條件和規格說明書中給出了色譜柱的使用說明。使用驗收報告單中所列舉的標準樣品進行柱性能的測試,并計算樣品中的某個組份或多個組分的不對稱因子、理論塔板數和分離度。請留心樣品的保留時間,因為其會成為今后進行對比的參照基準。


清洗所有類型的 TSK-GEL 液相色譜柱的基本原則

1.按照相反的流動方向進行色譜柱的清洗。

2.不要將色譜柱與檢測器連接。3.流速選擇為最大流速的一半,并切實進行柱壓的監控。

4.如果您打算使用 pH 值較高或者較低的溶液進行柱清洗的話,一定要確認您所使用的色譜系統的其它部分(如:泵、泵的密封圈、進樣器等等)是否適合。

5.使用至少 5 個色譜柱體積(5CV)的各種清洗溶液進行清洗,各個清洗步驟之間一定要使用 5 個柱體積的超純水進行沖洗。

6.使用您正使用的實驗方案中的 5 個柱體積的流動相進行柱子的平衡。

我們在操作條件和規格說明書中推薦了適合各種類型的 TSK-GEL 液相色譜柱使用的清洗溶液,您可以根據柱子和樣品的種類選擇。一般來說,低 pH 值的鹽溶液能夠清洗堿性蛋白;有機溶劑能夠清洗疏水性蛋白;尿素、界面活性劑等能夠清洗強吸附物質。


清洗溶液

SW&SWxl系列色譜柱

1.pH較低(如:pH3.0)、濃度較高的鹽溶液(如:0.5MNa2SO4);2.添加水溶性有機物(MeOH、ACN、EtOH、10%-20%)的極性緩沖液;3.SDS(0.1%)、尿素(8M)或胍(6M)的緩沖溶液。注意:這些試劑很難被去除。它們需要使用 20-40 個柱體積的 20%ACN進行沖洗。因此,只有當先前的清洗方法無效時才選擇使用本方法。


PW&PWxl 系列色譜柱

1.高鹽極性緩沖液(如:0.5M-1.0MNa2SO4);

2.pH較低(如:2-3)或較高(如:11-12)的緩沖溶液;

3.添加水溶性有機物(MeOH、ACN、EtOH、10%-20%)的極性緩沖液;

4.SDS(0.1%)、尿素(8M)或胍(6M)的緩沖溶液。注意:這些試劑很難被去除。


SW 類離子交換系列色譜柱

1.高鹽極性緩沖液(如:0.5M-1.0M Na2SO4);

2.較低pH值(如:2-3)的緩沖液;

3.添加水溶性有機物(MeOH、ACN、EtOH,10%-20%)的極性緩沖液;

4.添加尿素(8M)或非離子性表面活性劑的緩沖溶液。注意:這些試劑很難被去除。?


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